Laboratorio Nacional de Referencia para

Vigilancia Sanitaria.

Hospital Pediátrico Docente “William Soler”.
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Análisis Cuantitativo y Efecto de Residuos en Procesos de Esterilización Química a Bajas Temperaturas.

 

Autores:

 

Roxana Hidalgo Rodríguez. [1]
Jefa del Laboratorio Nacional de Referencia para Prevención y Control de Infecciones Intrahospitalarias en Cuba.
roxyfelipe@yahoo.es

Sonia Chiroles Despaigne.[2]             
Odalys Villavicencio Betancourt.[3]

 

 

Dirección: Calle 10 # 61 e/ C y D Lawton. C.P. 10700 Ciudad Habana. Cuba.

                   

 

 


RESUMEN

 

En el presente trabajo se desarrollan tres métodos químicos de análisis que permiten determinar la existencia de residuos posterior al proceso de esterilización y el efecto acumulativo de los mismos en sucesivas esterilizaciones.

Para la realización del trabajo utilizamos un esterilizador modelo 130 LF marca Matachana, de fabricación española, cuyo principio de funcionamiento se basa en el uso de temperaturas bajas, empleando formaldehído al 2% en fase de vapor, como agente esterilizante.

Las evaluaciones realizadas a esta tecnología, fueron comparadas con el método de referencia de esterilización química, que utiliza una mezcla de CO2 con óxido de etileno a bajas temperaturas.

Se realizan determinaciones de niveles de formaldehído residual, tanto al área de trabajo, como a dispositivos muestras (catéteres) compuestos químicamente por cloruro de polivinilo (PVC) y fluoroetileno propileno o teflón (FEP).

Los niveles de residuos del producto sobre los dispositivos, resultaron por debajo del valor límite permisible (0.1 µg/cm2), para la primera esterilización y las 4 reesterilizaciones realizadas. Lo que demuestra la eliminación de residuos del agente esterilizante dentro del propio proceso de esterilización, permitiendo el uso inmediato de los materiales, una vez terminado el proceso.

Los valores de concentración de residuos en el área de trabajo se encuentran por debajo del valor límite de exposición en el ambiente ( 0.91mg/m3).

La compatibilidad del agente esterilizante se puede catalogar de excelente, al no interactuar con los componentes químicos estructurales de los dispositivos tratados, lo  que evita el riesgo de pérdida de funcionalidad del material.


INTRODUCCION

 

El modo de acción, así como la compatibilidad con el material a procesar, son factores determinantes al elegir o combinar agentes esterilizantes  para conformar una metodología. 

En el pasado siglo, hasta la década de 1950, la mayoría de los dispositivos y equipos médicos estaban formados por cristales, metales y gomas de fácil y rápido desmonte.

Con el advenimiento del plástico, las casas fabricantes comenzaron a confeccionar dispositivos mucho más sencillos en cuanto a conformación estructural, lo cual abarataba su costo, proporcionándole los mismos a los hospitales listos para su uso.

La composición polimérica de estos artículos los hacía sensibles a las altas temperaturas, parámetro que empleaban los procedimientos de esterilización establecidos, convertiéndolos en dispositivos confeccionados “para un solo uso”.

La complejidad de las técnicas de diagnóstico y demanda por parte de los pacientes así como el aumento de enfermedades infecto-contagiosas como el HIV, Hepatitis B y C aumentaron el costo, resultando estos factores determinantes para el desarrollo de nuevas alternativas, que permitieran el reprocesamiento de estos artículos inicialmente confinados para un solo uso.

Una de las metodologías, se basa en el empleo del gas óxido de etileno (OxEt)  como agente esterilizante químico, cumpliendo los límites de reducción en la carga microbiana normados para los procesos de esterilización(1).

El principio de funcionamiento de esta metodología requiere de la remoción de residuos generados durante el proceso, los cuales se adhieren a las superficies de los dispositivos reprocesados.

La eliminación total o disminución de residuos a límites permisibles normados requiere de un proceso de detoxificación que va desde 48 horas hasta 10 días(2)  o más en dependencia del aumento del número de reesterilizaciones realizadas a un mismo dispositivo(3).                                               

En 1978, la Agencia de Protección Ambiental (EPA) determinaron que el OxEt era un agente mutagénico y su uso debía ser restringido(4). También fue regulada la mezcla de este gas con compuestos fluorocarbonados, debido al efecto degradativo que causan sobre la capa de ozono (capa protectora de la Tierra) (5).

Como resultado de estos estudios, se ha intensificado por parte de investigadores y casas fabricantes, la búsqueda de tecnologías alternativas sobre procesos de esterilización que empleen bajas temperaturas (< 600C).

Teniendo en consideración la necesidad cada vez más vital de “reprocesar” artículos clasificados como críticos que resultan de una creciente demanda actual y tomando como base el criterio de la compatibilidad entre los dispositivos y el agente esterilizante, con la finalidad de lograr reusar un artículo médico, equipo o accesorio sin que se promuevan riesgos de pérdida de funcionalidad lo que desencadenarían en riesgos de infección nosocomial, nuestro equipo de trabajo desarrolló un estudio evaluativo a un equipo esterilizador que basa su principio de funcionamiento en el uso del formaldehído al 2% en fase de vapor a bajas temperaturas comparado con la metodología de óxido de etileno, tecnología de referencia.


MATERIALES Y METODOS

 

Se realizaron estudios químico que permitieron evaluar de forma cuantitativa, la acumulación  de residuos del agente esterilizante sobre los dispositivos tratados y en el área de trabajo.

Para la cuantificación de residuos en los dispositivos, se emplearon fragmentos de catéteres de PVC y FEP. El tratamiento de los dispositivos, fue realizado siguiendo los procedimientos estandarizados en la norma ISO-10993-12, 1995(6).

Para la determinación de los residuos de aldehídos sobre los dispositivos, aplicamos la metodología descrita por Vang Handlos en 1977(7), cuyo fundamento, se basa en la cuantificación de los niveles de formaldehído adheridos sobre el material, mediante la absorción de los mismos con hidróxido de sodio 0.2N y su posterior neutralización con ácido sulfúrico 0.2N, en baño de agua termostatada, a una temperatura de 400C± 2 0C.  Simultáneamente se procesó un blanco muestra, formado por el mismo material sin esterilizar, para determinar la posible interferencia de los componentes del material y de los reactivos utilizados en la determinación.

La lectura fue realizada a una longitud de onda de 412nm en un espectrofotómetro. Los resultados obtenidos, fueron comparados con los límites establecidos por el Laboratorio de Salud y Seguridad Ambiental de Lübeck, Alemania en 1996(8) , estandarizados como límites permisibles, valores inferiores e iguales a 0.1µg/cm2.

Se realizó  un total de 5 pruebas por ciclo de esterilización, cada una formada por 3 fragmentos de catéteres de PVC y FEP.

Se realizó un total de 4 reesterilizaciones, para cuantificar la acumulación de residuos por cada ciclo de esterilización.

En la determinación de residuos de óxido de etileno sobre el material, se realizaron evaluaciones a diferentes tiempos durante el proceso de destoxificación, comprendidos estos entre 3, 7 y 10 días respectivamente.

Se realizó un total de 4 reesterilizaciones, para cuantificar la acumulación de residuos, sobre un mismo dispositivo, posterior a los 10 días del proceso de destoxificación.

La metodología aplicada en la determinación, fue la descrita por Lacome en 1974(9), la cual basa su fundamento, en la extracción del óxido de etileno adherido al material por medio de agua destilada acidificada, en baño de agua termostatada, a una temperatura de 980C ± 2 0C durante 60 minutos, para garantizar la hidrólisis completa de los residuos presentes. Simultáneamente se procesó un blanco muestra, formado por el mismo material sin esterilizar, para determinar la posible interferencia de los componentes del material y de los reactivos utilizados en la determinación.

La técnica empleada, responde a un método colorimétrico, cuyo límite de sensibilidad detecta hasta 1µg/mL y se fundamenta en la reacción que ocurre entre el ácido cromotrópico y el formaldehído obtenido en la oxidación peryódica del etilen glicol, debido a la hidrólisis del óxido de etileno. La lectura, se realiza a una longitud de onda de 570 nm en espectrofotómetro.

Los resultados obtenidos, son comparados con los límites permisibles estandarizados por la Administración de Salud y Seguridad Ocupacional en 1998(10) , los cuales establecen valores inferiores e iguales a 1 mg/8 horas de exposición al dispositivo. 

En la determinación de residuos de formaldehído, alrededor de la zona de trabajo, se realizó un monitoreo ambiental, mediante la técnica de muestreo puntual de tiempo parcial, cuyo fundamento se basa en la absorción de formaldehído con disolución de ácido sulfúrico concentrado.

La lectura se cuantifica en un espectrofotómetro, donde la intensidad de coloración violeta formada, es proporcional al contenido de formaldehído en la muestra. 

Se realizaron tres tomas de muestras en diferentes puntos dentro del área operacional, alrededor del equipo, conformadas por: la parte delantera del equipo, durante la etapa de inyección de formaldehído, parte trasera del esterilizador,  lugar donde se ejecuta drenaje de formaldehído, parte delantera del esterilizador, durante la apertura de la puerta de la cámara esterilizadora al término del proceso de esterilización. Los resultados obtenidos, son comparados con los límites permisibles estandarizados por Administración de Salud y Seguridad Ocupacional en 1998, los que conforman valores inferiores a 0.91 mg/m3 de área.    

 

Procesamiento estadístico

 

Los  datos primarios fueron recogidos en una base de datos creada en el Sistema Excel 2000, realizando el procesamiento estadístico en el SPSS (Statistical Package for Social Sciences) for WINDOWS, Versión 10.0. Todos los procedimientos fueron realizados en una microcomputadora Pentium III.

Se obtuvieron distribuciones de frecuencias simples, promedios y desviaciones estándares para distintas variables estudiadas. Para evaluar si  el nivel de concentración de residuos superaba el valor del límite permisible se  aplicó la prueba t de Student. Los resultados se presentan en tablas  estadísticas para su mejor comprensión.

 

RESULTADOS

 

El resultado de los estudios químicos, que se muestra en la tabla I,  cuantifica la adhesión de residuos del agente esterilizante sobre los dispositivos tratados en 5 pruebas realizadas, está conformado, por el promedio de la concentración de formaldehído en 3 dispositivos muestra, por cada ciclo de esterilización para el esterilizador prueba.

El valor del blanco, formado por el promedio de tres muestras que no fueron tratadas.

Se expresan además los valores correspondientes al peso de las muestras antes y después del tratamiento con formaldehído.

Los valores de concentración obtenidos, para los fragmentos de materiales compuestos de PVC y FEP, se encuentran por debajo del valor del límite permisible (0.1µg/cm2).

En la tabla II, se muestra el resultado del análisis estadístico, conformado por el cálculo de la prueba “t de Student” al valor promedio de 3 muestras de catéteres durante las 5 pruebas realizadas para ambos ciclos de esterilización, los grados de libertad y el nivel de significación.  

 

En la tabla III, se expresan los resultados del proceso de evaluación de residuos acumulados sobre un mismo dispositivo durante 4 esterilizaciones sucesivas, para ambos tipos de materiales (PVC y FEP).

Se expone el valor de concentración de la muestra blanco (muestra no procesada) y el peso de las muestras antes y después de haber sido tratadas con el agente esterilizante.

Los valores obtenidos en cada reesterilización corresponden al valor promedio de tres muestras procesadas y se encuentran por debajo del límite permisible.  

Se expone además el promedio de las reesterilizaciones y la desviación estándar.

En la tabla IV, se observa el resultado del procesamiento estadístico conformado por el cálculo de la prueba “t de Student” al valor promedio de 3 muestras de catéteres durante las 4 reesterilizaciones realizadas a los mismos dispositivos  para ambos tipos de materiales por ciclo de esterilización, los grados de libertad y el nivel de significación.

 

Los resultados de la cuantificación de residuos de óxido de etileno, durante el proceso de destoxificación se observan en la tabla V.

Los valores corresponden al promedio de tres muestras procesadas durante el 3ro, 7mo y 10mo día del proceso. Los niveles de concentración obtenidos, resultan la dosis media diaria de residuos de óxido de etileno que puede ser  liberado al paciente, durante una exposición prolongada del catéter (24 horas hasta 30 días), para lo cual se ha normado un límite de 2mg/día.

Los resultados de la acumulación de residuos de óxido de etileno, sobre un mismo dispositivo, procesado en cuatro esterilizaciones sucesivas, se muestran en la tabla VI, donde se exponen los datos correspondientes al valor promedio de tres muestras de fragmento de catéter de PVC y FEP, por cada reesterilizacion, así como el incremento de residuos, 14 días después de iniciado el proceso de destoxificación, donde se expresa la dosis media diaria de residuos de óxido de etileno liberada al paciente durante una exposición prolongada del catéter (24 horas hasta 30 días), para la cual el valor del límite normado se considera igual o menor a 2mg/día. Los valores obtenidos a partir de la segunda reesterilización, exceden el valor del límite en los dispositivos compuestos por PVC.

Los resultados correspondientes a la cuantificación de residuos de formaldehído, alrededor de la zona de trabajo, se exponen en la tabla VII. En la misma, se reflejan los valores promedios, correspondientes a tres muestras, realizadas durante el transcurso de tres etapas del proceso en cuestión.

Parte delantera del equipo, durante la etapa de inyección de formaldehído. Parte trasera del esterilizador, donde se realiza el drenaje de formaldehído, durante la etapa propiamente dicha.

Parte delantera, en el momento de la apertura de la cámara esterilizadora.

La concentración de formaldehído obtenida, durante las etapas de trabajo del equipo, se encuentra por debajo del límite establecido.

 

DISCUSION DE RESULTADOS

 

El resultado de los estudios químicos mostrados en las tablas I y III, que cuantifica la acumulación  de residuos del agente esterilizante, sobre los dispositivos compuestos de PVC y FEP, tratados por formaldehído, una vez y en 4 esterilizaciones sucesivas se encuentra por debajo del valor límite permisible (0.1µg/cm2). Por medio de este estudio, se demuestra la eliminación de residuos del agente esterilizante durante el proceso de esterilización para este tipo de alternativa química y la no-acumulación de residuos, posterior a cada una de las reesterilizaciones realizadas, lo que queda evidenciado además, por los resultados del peso de los fragmentos, el cual mantiene su mismo valor antes y después del proceso.

La comprobación de estos estudios se observa en las tablas II y IV en las que se muestra el análisis estadístico conformado por la prueba “t”, para la que se obtienen resultados altamente significativos en ambos procesos, tanto para los catéteres de  PVC como para los de FEP, corroborando que la concentración de residuos de formaldehído es muy inferior a 0.1 µg/cm.

Desde el punto de vista toxicológico, estos estudios tienen gran importancia,  permitiendo comprobar que la concentración de uso del agente esterilizante en este proceso no causa daños al paciente, cumpliendo así con el criterio de “ no-toxicidad” que debe cumplir un agente esterilizante al ser elegido según conclusiones de Schneider en 1994(11) .

Los resultados evidencian la total eliminación de los residuos del agente esterilizante dentro del propio ciclo y la no-acumulación de subproductos en sucesivas esterilizaciones aplicadas a un mismo material.

Fue comprobada de forma cualitativa, la compatibilidad del agente esterilizante con el material, al no producirse cambios en la apariencia de los dispositivos, que ocasionen pérdida de su funcionalidad, luego de 4 ciclos repetidos. 

Los resultados expuestos en la tabla V, obtenidos con relación a la determinación de residuos, posterior al  tratamiento de los dispositivos empleando óxido de etileno en la primera esterilización,  demuestran la fuerte adhesión de los residuos del agente esterilizante a la superficie interna de los dispositivos tratados y su lenta eliminación, obteniéndose valores altos de concentración del producto aún en el 10mo día del proceso de destoxificación.

Estos valores no sobrepasan el valor del límite, pero en las 4 reesterilizaciones subsiguientes tabla VI, se observa el incremento paulatino de residuos acumulados, incluso se sobrepasa el valor del límite a partir de la segunda reesterilización, lo que requiere de un tiempo mayor de destoxificación de los dispositivos. Estos datos, resultan de gran valor desde el punto de vista toxicológico, durante una exposición prolongada del dispositivo sobre el paciente, en la que la dosis media de liberación diaria de residuos, afecta al paciente.

Según estudios realizados por Rutala y Harmory, en 1989(12), la toxicidad crónica, es la capacidad que posee un agente esterilizante de causar daño, como resultado de la repetida exposición a bajos niveles del mismo, durante un período de tiempo prolongado.

El incremento del peso en los dispositivos evaluados por óxido de etileno, posterior al proceso de esterilización, con relación al peso antes del tratamiento tabla V, evidencia la mayor acumulación de residuos en los fragmentos compuestos por PVC, que en los compuestos por FEP, lo cual es debido a la acción reiterada del agente esterilizante sobre los agentes plastificantes que componen la estructura de este tipo de dispositivo, esta interacción causa migraciones y como consecuencia se intercalan compuestos de etileno aumentando el poro de las superficies internas, lo que hace al dispositivo más susceptible a la adhesión de residuos en sucesivas esterilizaciones. Evidenciándose este planteamiento en los valores mostrados en la tabla VI.

Estos datos se corroboran al examinar cualitativamente el material, posterior a la tercera reesterilización  por óxido de etileno, en el que observamos incremento en el tamaño de los poros en los fragmentos de catéteres compuestos por PVC, así como desgaste en la capa más externa, lo que pudiera ocasionar incremento en el riesgo de pérdida de la funcionalidad del dispositivo. Estos detalles de control de calidad, no son perceptibles a simple vista, por lo que los estos datos resultan de gran importancia desde el punto de vista técnico, para la conformación de normas o regulaciones a tener en cuenta en el reprocesamiento de dispositivos médicos utilizando esta metodología, hasta tanto no sea sustituida por otra alternativa.     

En los catéteres compuestos por FEP, la composición químico-estructural de las paredes internas la hace menos porosa, por lo que la adhesión de residuos es menor, resultando menor la interacción de los agentes opacificantes con el óxido de etileno y por ende menos susceptible al incremento de residuos acumulados en sucesivas esterilizaciones, tabla VI.

Nuestros resultados son coincidentes a los obtenidos por Mermel en el período comprendido entre 1992- 1995(13), en el cual desarrolla un estudio de compatibilidad del material expuesto a óxido de etileno y las reacciones adversas ocasionadas, durante un período de exposición prolongada de los dispositivos utilizados en pacientes.

Recientemente Vanek en 1997(14),  desarrolló un estudio químico de determinación  de niveles de adhesión de óxido de etileno sobre un tipo específico de catéter compuesto por PVC (Aquavene), que al ponerse en contacto con el paciente  desencadenó  reacciones de hipersensibilidad.

 

Con relación a los resultados obtenidos en el estudio ambiental mostrados en la tabla VII, en los que se cuantifica residuos de formaldehído alrededor del área operacional, podemos plantear que no se detectaron emanaciones del gas que produjeran niveles de contaminación por encima del valor límite establecido por la norma de evaluación. Estos resultados corroboran el cumplimiento de los parámetros establecidos por Schneider en el uso de agentes esterilizantes “no tóxicos” para el personal asistente y el medio ambiente. Por lo tanto, el proceso de esterilización que emplea formaldehído no resulta tóxico a la concentración de uso, tanto para el paciente durante la exposición prolongada de los dispositivos tratados, como para el personal asistente debido a la comprobación de no-emanación de gases a al zona de trabajo.

Aunque en nuestro estudio no se pudo realizar la determinación de residuos de óxido de etileno en la zona operacional, análisis realizados por distintos grupos de investigadores han demostrado los daños al personal asistente ocasionados por exposición crónica a residuos de este gas. Ejemplos de lo anteriormente planteado es el estudio realizado por Estrin en 1990(15) el cual realiza una evaluación neurotoxicológica a trabajadores de la unidad central de esterilización de un hospital, en el cual queda evidenciado resultados de disfunción neurológica y reducción de la velocidad psicomotora en  aquellos trabajadores con mayor número de horas de exposición en el área.

Un estudio epidemiológico realizado por Rowland en 1996(16, demostró el incremento del riesgo de abortos espontáneos y nacimientos pre-  término por exposición ocupacional de mujeres en estado de gestación, operadoras de equipos de esterilización por óxido de etileno.

Teniendo en consideración las evidencias de estos estudios, sobre el daño ocasionado por  períodos largos de exposición, a pequeños niveles de residuos de óxido de etileno, se hace necesaria la sustitución  de esta metodología por una alternativa que cumpla con los límites de toxicidad para el paciente, personal asistente y medio ambiente.

 

CONCLUSIONES

 

La cuantificación de los residuos de formaldehído en los dispositivos compuestos por PVC y FEP estuvieron por debajo del valor límite permisible, evidenciando la total eliminación del agente esterilizante presente dentro del propio ciclo y la no-acumulación de subproductos en sucesivas esterilizaciones aplicadas a un mismo material.

En la zona de trabajo, no se reportaron emanaciones de formaldehído durante la inyección del producto a la cámara esterilizadora, ni se detectaron niveles de residuos del producto en la etapa de remoción y apertura de la cámara.

 

Tabla I. - Concentración de residuos de formaldehído en dispositivos muestra posterior al proceso de esterilización.

 

Concentración - valor promedio, de residuos en 3 fragmentos muestras,     

                           posterior al proceso de esterilización

     P - Peso de los fragmentos de PVC y  FEP antes y después del proceso de 

          esterilización

 

Tabla II.- Análisis estadístico conformado por la Prueba “t-student

 

Tabla III.- Concentración de residuos de formaldehído en dispositivos muestra en 4 esterilizaciones sucesivas.

 

 

Concentración - valor promedio de concentración de residuos en 3

                           fragmentos muestras  posterior a 4 reesterilizaciones

P - Peso de los fragmentos de PVC y  FEP antes y

después del proceso de esterilización

 

Tabla IV.- Análisis estadístico conformado por la Prueba “t-student

 

 

Tabla V.- Concentración de residuos de Ox Et en el tiempo de detoxificación

 

 

                     DM- Dosis media diaria de óxido de etileno liberada/día

P - Peso de los fragmentos de PVC y  FEP antes y

                           después del proceso de esterilización

 

Tabla VI.- Concentración de residuos de Ox  Et después de transcurridos 14 días de detoxificación.

 

 

           DM- Dosis media diaria de óxido de etileno liberada/día

 

 

Tabla VII.- Niveles de residuos de formaldehído, expresado en mg/m3 de área durante las etapas del proceso, comparado con el límite normado.

Muestra 1- Parte delantera del equipo (etapa de inyección de formaldehído)

Muestra 2- Parte trasera del equipo (etapa de ejecución de drenaje)

Muestra 3- Parte delantera del equipo ( apertura de la cámara, al finalizar el proceso)

Concentración  – niveles de residuos de formaldehído expresada en (mg/m3)

CMA - Concentración de residuos de formaldehído en el área operacional en 8 horas de exposición 

 

 


BIBLIOGRAFIA

 

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[1] Master en Microbiología.

 

[2] Técnico en Química y Farmacia

[3] Técnico en Microbiología